标签：移液器吸头 滤芯吸头 移液器

关于实验室移液器吸头工作原理、特性、用途应用范围，您知道吗?

移液器枪头盒的作用是什么? 盒子是用来保护吸头，减少污染，有的吸头盒盖还可以客串样品槽.

1. 使用合适的吸头：

为确保更好的准确性和精度，建议移液量在吸头的 35%-100% 量程范围内。

2. 吸头的安装：

对于大多数品牌的移液器，特别是多道移液器，安装吸头并非易事：为追求良好的密封性，需要将移液套柄插入吸头后，左右转动或前后摇动用力上紧。也有人会用移液器反复撞击吸头来上紧，但这样操作会导致吸头变形而影响精度，严重的则会损坏移液器，所以应当避免出现这样的操作。RAININ(瑞宁) 的多道移液器没有 O 型环，配合有前挡点的吸头，只需轻压一下即可达致理想密封，实在是多道移液器使用者的福音。

3. 吸头浸入角度和深度：

吸头浸入角度控制在倾斜 20 度之内，保持竖直为佳; 吸头浸入深度建议如下所示：

移液器规格吸头浸入深度

  • 2L 和 10 L 1 mm

  • 20L 和 100 L 2-3 mm

  • 200L 和 1000 L 3-6 mm

  • 5000 L 和 10 mL 6-10 mm


4. 吸头润洗：

对常温样品，吸头润洗有助于提高准确性; 但是对于高温或低温样品，吸头润洗反而降低操作准确性，请使用者特别注意。

5. 吸液速度：

移液操作应保持平顺、合适的吸液速度; 过快的吸液速度容易造成样品进入套柄，带来活塞和密封圈的损伤以及样品的交叉污染。

【专家建议】：

1、移液时保持正确的姿势; 不要时刻紧握移液器，使用带指钩的移液器帮助缓解手部疲劳; 有可能的话经常换手操作。
2、定期检查移液器的密封状况，一旦发现密封老化或出现漏液，须及时更换密封圈。
3、每年对移液器进行 1-2 次校正 (视使用频率而定)。
4、绝大多数移液器，在使用前和使用一段时间后，要给活塞涂上一层润滑油以保持密封性; 对于 RAININ 常规量程的移液器，不涂润滑油也同样拥有理想的密封性。

>> 自动微量移液器再配以带滤芯的吸头是 PCR 实验的必备工具：

自动 DNA 合成仪合成的寡核苷酸引物无需进一步纯化即可用于标准 PCR。如果引物经过市售树脂柱色谱 (如 NENSORB; NEN Life Science 公司产品) 或变性聚 bxxa 凝胶纯化，从哺乳动物基因组模板扩增单拷贝序列的效率会更高 (在第 2 章，方案 3 中)。

●模板 DNA。模板可以是 DNA 片段、制备的基因组 DNA、 重组质粒，或者是任何其他含有 DNA 的样本。模板 DNA 溶解于含有低浓度 EDTA (<0.1 mmol/L) 的 10 mmol/L Tris-Cl(pH7.6)。

●耐热的 DNA 聚合酶。Taq DNA 聚合酶是适用于大多数形式的 PCR 扩增阶段的标准的、合适的酶。但是，当 3' 端错配引物延伸可疑时，可优先考虑具有 3'→5' 校正活性的热稳定 DNA 聚合酶 (Chianget al.1993) (参见前页「热稳定 DNA 聚合酶」部分和信息栏「Taq DNA 聚合酶」)。

Taq DNA 聚合酶储存于含有 50% 甘油的储存缓冲液中。该溶液相当黏稠，难以用移液器进行准确吸加。办法是用离心机将盛有酶的离心管在 4'C 高速离心 10s，然后用正排量移液器吸取所需酶量。

●自动移液器。自动微量移液器再配以带滤芯的吸头是 PCR 实验的必备工具。带有隔水屏障的一次性带滤芯的吸头可防止样品液体不小心流入微量移液器，同时减少 PCR 与 DNA 样品在实验过程中存在交叉污染的可能性。

一：移液枪使用诀窍

1. 影响移液枪精度因素

(1) 温度：室温低时，手温较高，使得空气膨胀，吸入冷溶液时往往发生误差

(2) 气密性：tip 和枪体的结合部，以及枪内柱体之间的长期磨损，造成误差

(3) 吸速：容易造成 tip 内气泡产生，而且会污染枪头

(4) 试剂的挥发：吸挥发性高的试剂时，蒸汽进入枪头，内压增高，结果在压出液体时，压力变大，而产生误差。解决办法：反复抽吸 4-5 次就可改善。

2. 使用注意事项

(1) 吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。

(2) 为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层「液膜」，造成排液量偏小而产生误差。

(3) 浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。

(4) 可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1 mL 蒸馏水 20℃ 时重 0.9982 g。

(5) 移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的，长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。

(6) 移液器未装吸头时，切莫移液。

(7) 在设置量程时，请注意? 旋转到所需量程? 数字清清楚楚在显示窗中? 所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程，否则会卡住机械装置，损坏了移液器。

(8) 移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体 (如，浓酸、浓碱、有机物等)。

(9) 严禁使用移液器吹打混匀液体。

(10) 不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度。同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作。

二、移液器错误操作及处理方法

做为液体操作中常用的手动可调精密移液器，在使用过程中有些错误的操作会给操作本身带来误差，有些会造成机器的损坏等，在这里简单总结如下：

错误：装配吸头时用移液器反复撞击吸头，以上紧

正确：插入吸头，左右轻转旋转上紧吸头

分析：撞击会造成移液器内部齿轮组合的松动，长期操作会对移液器的精确性造成影响。

错误：吸头与移液器不匹配，影响气密性正确：选用与移液器匹配的，有质量保证的吸头

分析：吸头的不匹配，主要表现为对气密性的影响。会直接影响移液器的精确性，通常会移液操作会小于设定量。

错误：吸液时，移液器倾斜吸液

正确：垂直吸液

分析：倾斜的状态会造成气压面的改变。会对移液精度造成影响。

错误：吸头内含有未打出的液体时，移液器平置于桌面

正确：将移液器垂直挂在移液器支架上

分析：吸头内含有未打出液体，移液器平放之后液体有可能会流到移液器体内部，这会对移液器内部组件造成影响，严重的回造成损坏，较差污染等情况的发生。

错误：用大量程的移液器移取小体积的液体

正确：移液体积需保证在移液器所提供的量程范围之内才符合不准确度和不精确度的要求

分析：因为空气垫的存在，是造成移液器不准确度的主要原因。移液器的选择应该是量程，接近目的液体转移量的选型原则。

错误：吸取具有强挥发性的液体

正确：不建议用普通移液器做强挥发型液体转移

分析：如果一定要移取强挥发性的液体，应该在移液结束后立刻拆开移液器，让蒸汽挥发，同时，建议使用外置活塞式移液器。

错误：吸液速度和放液速度过快

正确：慢吸慢放

分析：快吸对于 1 mL 及以上量程的移液器，很容易造成液体上冲。过快的放液会增加液体的残留量。


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